EzRed? 核酸染料是一種超靈敏、極其穩(wěn)定且對(duì)環(huán)境安全的熒光核酸染料,可替代劇毒的溴化乙錠 (EB),EzRed? 核酸染料是一種的油性大分子,不能穿透細(xì)胞膜進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)。不易揮發(fā)升華,人體不會(huì)吸入。艾姆斯氏測(cè)試結(jié)果表明EzRed? 核酸染料在凝膠染色濃度下無(wú)誘變性,是一種安全無(wú)毒的核酸染料。EzRed? 核酸染料與EB具有相同的光譜特性,無(wú)需改變?yōu)V光片及觀察裝置(普通紫外凝膠透射儀),在300 nm處紫外光激發(fā)檢測(cè)即可,但是EzRed? 核酸染料不能被488nm氬離子激光器或者類似波長(zhǎng)的可見光激發(fā),通常不推薦用該類激發(fā)裝置的儀器成像。EzRed? 核酸染料適用于瓊脂糖和聚丙x酰胺凝膠電泳中的dsDNA, ssDNA以及RNA染色,可以選擇膠染法或泡染法進(jìn)行染色,使用非常方便、靈活。本產(chǎn)品以溶解在水溶液中的形式存在。溶解在水中的 EzRed? 核酸染料是更安全的配方,強(qiáng)烈推薦使用水溶液的EzRed? 核酸染料。
EzRed? 核酸染料有如下特點(diǎn):
1.比EB更安全:無(wú)致突變性和處置無(wú)害
2.比EB和SYBR? Safe 靈敏得多
3.在室溫下穩(wěn)定,可微波加熱
4.簡(jiǎn)單的預(yù)制或電泳后凝膠染色,無(wú)需脫色
5.在不改變?cè)O(shè)備或光學(xué)設(shè)置的情況下替換EB
6.兼容下游凝膠純化、限制性消化、測(cè)序和克隆
運(yùn)輸與保存
常溫運(yùn)輸;避光室溫保存,有效期5年。
使用方法
由于核酸結(jié)合染料會(huì)影響 DNA 遷移,強(qiáng)烈建議行電泳,凝膠后染色。使用EzRed? 進(jìn)行后染色具有出色的靈敏度,并消除了染料干擾 DNA 遷移的可能性?。。?br />
一、膠染法(同EB,電泳前染色)
1. 配制合適濃度的瓊脂糖凝膠,微波爐加熱至熔化。
2. 加入EzRed? 核酸染料,使用終濃度為1×(即每50 mL 瓊脂糖溶液中加入5 μL EzRed? 10,000×水溶液)。
3. 將含有EzRed?核酸染料的瓊脂糖溶液倒入制膠器并插好梳子,室溫下凝固約30-60 min。
4. 按照常規(guī)方法上樣并電泳。
5. 紫外拍照觀察。
【注】:EzRed?具有良好的熱穩(wěn)定性,可以在熱的瓊脂糖溶液中直接添加,也可以將EzRed?儲(chǔ)液加到含有瓊脂糖粉末的電泳緩沖液中,然后用微波爐或其他常用方式加熱以制備瓊脂糖凝膠。EzRed?兼容所有常用的電泳緩沖溶液。
二、泡染法(電泳后染色)
1. 配制合適濃度的瓊脂糖凝膠,微波爐加熱至熔化。
2. 將瓊脂糖溶液倒入制膠器并插好梳子,室溫下凝固約30-60 min。
3. 按照常規(guī)方法上樣并電泳。
4. 用0.1 M NaCl溶液稀釋EzRed? 10,000×水溶液至3× 染色液(即將15 μL EzRed? 10,000×水溶液加入到50 mL 0.1 M NaCl溶液中,該染液可重復(fù)使用3次左右,室溫避光保存)。
5. 將凝膠放入合適的容器中,加入3× 染色液浸沒凝膠。室溫振蕩染色30 min左右。染色時(shí)間與凝膠厚度及濃度有關(guān)。對(duì)于含3.5~10%聚丙x酰胺的凝膠,染色時(shí)間通常介于30 min到1 h,并隨聚丙x酰胺含量增加而延長(zhǎng)。
6. 紫外拍照觀察。
注意事項(xiàng)
EzRed? 核酸染料(10,000×水溶液)
1. 若大分子條帶拖尾且分離不理想,建議減少DNA marker或核酸樣本的上樣量。
2. 膠染法不適合預(yù)制聚丙x酰胺凝膠,對(duì)于聚丙x酰胺凝膠請(qǐng)使用泡染法。
3. 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
4. 本產(chǎn)品僅作科研用途!
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天正信達(dá) 核酸染料